ctab提取rna检测

检测项目

RNA浓度测定：采用紫外分光光度法在260 nm波长进行测量，检测范围覆盖0.1至10000 ng/μl，精度±3%，确保样本量化准确。

RNA纯度分析：通过A260/A280吸光度比值评估，理想值为1.8至2.0，误差范围±0.05，指示蛋白质和酚类污染水平。

RNA完整性检测：使用琼脂糖凝胶电泳或毛细管电泳系统测定RNA完整数（RIN），范围0-10，RIN≥7.0表示高完整性，分辨率达50 nt。

DNA残留检测：应用实时PCR或DNase I处理，检测限低于0.05%，定量范围0.01-1%，消除基因组DNA干扰。

蛋白质污染检测：基于BCA或Bradford法，检测灵敏度0.1 μg/ml，范围0.1-200 μg/ml，评估残留蛋白杂质。

多糖残留分析：针对CTAB提取优化，采用苯酚-硫酸比色法，检测范围0-500 ppm，临界值10 ppm，防止下游实验抑制。

酚类物质检测：通过高效液相色谱法（HPLC）在280 nm分析，定量限2 ng/μl，范围0-50 ng/μl，减少PCR抑制效应。

降解产物评估：测定RNA片段大小分布，使用电泳或生物分析仪，检测范围25-10000 nt，评估降解比例。

RNase活性测试：基于荧光底物降解模型，检测灵敏度0.5 U/ml，范围0-100 U/ml，确保无酶污染影响稳定性。

离子浓度测定：如氯化钠残留，采用离子色谱法或电导率计，检测范围0.01-20 mM，精度±5%，优化缓冲条件。

pH值检测：测量RNA溶液酸碱度，范围6.0-8.5，使用pH计校准，确保样本稳定性。

含水量分析：通过卡尔费休法测定，检测范围0-5%，灵敏度0.1%，防止储存降解。

氧化损伤评估：检测8-氧代鸟苷修饰，采用质谱法，定量限0.1 ppb，范围0-100 ppb，评估RNA氧化状态。

微生物污染筛查：应用PCR扩增16S rRNA，检测限10 CFU/ml，确保无菌条件。

内毒素检测：基于鲎试剂法，范围0-100 EU/ml，灵敏度0.01 EU/ml，评估热原污染风险。

检测范围

植物叶片样本：常见于作物遗传改良研究，如水稻或玉米组织，用于基因表达分析。

动物组织样本：包括肝脏、肌肉或脑组织，应用于生物医学模型建立和疾病机制研究。

细胞培养物：贴壁或悬浮细胞系，如HEK293细胞，用于药物筛选和转录组学实验。

血液样本：全血、血浆或血清，用于临床诊断中的病毒RNA检测或遗传病筛查。

微生物样本：细菌、酵母或真菌培养物，适用于微生物组学和病原体研究。

环境样本：土壤、水体或空气滤膜中的微生物RNA，用于生态监测和污染评估。

食品样品：如肉类或果蔬，检测转基因成分或食源性病原体RNA，保障安全合规。

法医学样本：皮肤、唾液或毛发生物残留，用于身份鉴定和刑侦分析。

临床病理样本：福尔马林固定石蜡包埋组织，用于癌症相关RNA表达谱研究。

生物制药材料：细胞培养上清液或纯化产物，应用于疫苗或治疗性RNA质量控制。

昆虫样本：如蚊虫或果蝇，用于害虫控制基因编辑研究。

种子和花粉样本：应用于作物育种和生殖生物学实验。

废水处理样本：监测微生物群落动态，优化处理工艺。

古生物样本：化石或考古材料中的降解RNA，用于进化研究。

转基因作物样本：检测外源基因表达水平，确保生物安全。

检测标准

依据ISO 20184-1:2019标准执行RNA提取和质量控制流程，确保方法一致性。

GB/T 38502-2020提供核酸提取通用技术要求，涵盖样本处理和纯化步骤。

ASTM E288-01适用于核酸定量分析，规范紫外分光光度法操作。

GB/T 34796-2017规定RNA浓度测定紫外分光光度法标准，精度要求±5%。

ISO 17025:2017确保检测实验室质量管理体系，覆盖全流程验证。

EN ISO 22119:2011指导食品样品RNA检测方法，应用于病原体筛查。

GB/T 35822-2018针对植物RNA提取标准，优化多糖去除步骤。

ISO 20183:2018规范RNA完整性评估程序，包括电泳和生物分析仪使用。

ASTM E2060-00用于污染物检测方法验证，确保数据可靠性。

GB/T 33446-2016涉及分子生物学实验RNA样本制备要求。

检测仪器

紫外可见分光光度计：用于测量RNA在260 nm和280 nm吸光度，计算浓度和纯度比值，波长精度±1 nm。

实时荧光定量PCR系统：检测RNA靶标扩增动力学，评估DNA污染和表达水平，动态范围跨越6个数量级。

凝胶电泳装置：配合紫外透射成像仪，可视化RNA条带特征，评估完整性和降解片段，电压调节范围0-200 V。

生物分析仪：基于微流体芯片技术，精确测定RNA片段大小分布和RIN值，分辨率达5 nt。

高速冷冻离心机：用于RNA沉淀和洗涤步骤，转速可达20000 rpm，温度控制±1°C。

核酸自动提取仪：集成CTAB方法协议，处理高通量样本，提高重现性和效率。

微板分光光度计：适用于多孔板格式，快速测量96或384样本浓度，检测时间秒级。

离子色谱仪：用于离子残留检测，如钠或氯化物，灵敏度0.01 ppm。

荧光显微镜：结合荧光探针，直接观察RNA分布和细胞定位。

质谱仪：检测RNA氧化修饰或小分子污染物，质量精度±0.1 Da。

检测服务流程

确认测试对象及项目：根据要求确认测试对象并进行初步检查，安排样品寄送或上门采样;

制定与确认实验方案：制定实验方案并与委托方，确认验证方案的可行性和有效性;

签署委托书与支付：签署委托书，明确测试细节，确定测试费用并支付;

执行与监控实验测试：严格按照实验方案执行测试，记录数据，进行必要的控制和调整;

数据分析与出具报告：分析数据并进行归纳，撰写并审核测试报告，出具报告，并反馈结果给委托方。