抗病信号传导分析试验

检测项目

受体激酶活性检测：定量测定FLS2/EFR等模式识别受体自磷酸化水平，灵敏度0.1pmol/min·mg

MAPK级联反应分析：检测MPK3/MPK6磷酸化激活程度，Western blot检测限5pg

钙离子流动态监测：使用Fluo-4AM探针测定胞内Ca²⁺浓度波动，时间分辨率50ms

活性氧爆发检测：DAB染色法测定H₂O₂积累量，检测范围0.1-100μmol/L

水杨酸定量分析：HPLC-MS/MS测定内源性SA含量，精度±0.05ng/g

转录因子核定位验证：荧光标记NF-κB/WRKY蛋白，共聚焦显微镜定位精度200nm

病程相关蛋白表达：ELISA定量PR-1/PDF1.2蛋白表达，检测下限0.1ng/mL

防御基因表达谱：qRT-PCR检测NPR1/PAL等基因表达，Ct值误差±0.3

蛋白互作验证：Co-IP结合质谱分析互作蛋白复合体，分子量范围10-500kDa

细胞壁强化检测：间苯三酚法测定木质素沉积量，比色法精度±2%

胼胝质沉积观察：苯胺蓝染色定量β-1,3-葡聚糖，荧光定量误差±5%

系统获得抗性验证：挑战接种测定SAR持续时长，时间分辨率24h

检测范围

模式植物病理系统：拟南芥-丁香假单胞菌互作模型

粮食作物抗病育种：水稻白叶枯病抗性材料筛选

经济作物免疫诱导：柑橘溃疡病抗性激活剂评价

药用植物防御机制：人参锈病菌侵染应答研究

林木抗逆性研究：杨树溃疡病信号通路解析

模式动物免疫模型：果蝇Toll通路激活检测

水产养殖抗病育种：对虾白斑综合征抗性品系筛选

哺乳动物免疫应答：小鼠TLR4信号传导验证

真菌病原互作研究：稻瘟病菌效应蛋白功能验证

病毒侵染机制研究：TMV病毒运动蛋白抑制试验

生物农药作用机理：枯草芽孢杆菌诱导抗性评价

抗病转基因材料：过表达NPR1基因植株验证

检测标准

ISO 16640:2019植物免疫反应测定通则

ASTM E2945-18 激酶活性体外检测标准方法

GB/T 38578-2020 植物抗病性田间鉴定技术规范

ISO 21571:2020分子生物学检测样品前处理要求

GB/T 3543.5-2023农作物抗病虫性鉴定规程

ASTM F3136-20体外免疫信号通路分析指南

ISO 20408:2022蛋白质互作验证质控规范

GB/T 40462-2022植物激素检测液相色谱法

EN ISO 22118:2021病原相关分子模式纯化标准

GB/T 41708-2022基因编辑植物分子检测指南

ISO 21710:2020植物防御酶活性测定方法

ASTM E2674-18细胞信号传导试验质量控制

检测仪器

多功能酶标仪：Synergy H1型，配备温控振荡模块，执行Ca²⁺荧光信号动态采集（波长485/528nm）

激光共聚焦显微镜：LSM 900型，配备Airyscan2探测器，实现转录因子核质穿梭原位观测（分辨率120nm）

超高效液相色谱仪：ACQUITY UPLC H-Class，集成QDa质谱检测器，完成水杨酸等防御激素精确定量（保留时间偏差<0.1min）

实时荧光定量PCR系统：QuantStudio 6 Flex，配置384孔快速升降温模块，进行防御基因表达谱分析（控温精度±0.1℃）

蛋白质互作分析平台：Octet RED96e生物分子相互作用仪，实现受体-配体结合动力学检测（解离常数测定范围10⁻⁴-10⁻¹²M）

高通量磷酸化分析系统：PamStation12微流体芯片平台，同步检测48个激酶底物磷酸化（通量800样/日）

活性氧成像系统：IVIS Lumina III活体成像仪，配备冷CCD相机，完成H₂O₂爆发时空分布可视化（灵敏度0.5pM/cm²）

全自动Western blot系统：Jess Simple Western，实现MAPK磷酸化免胶定量（分子量分辨精度±2%）

细胞显微注射仪：FemtoJet 4i压电驱动系统，执行效应蛋白单细胞递送（注射体积精度10fL）

植物表型成像平台：PlantScreen XYZ整合式系统，进行系统抗性表型动态监测（分辨率3.2μm/pixel）

检测服务流程

确认测试对象及项目：根据要求确认测试对象并进行初步检查，安排样品寄送或上门采样;

制定与确认实验方案：制定实验方案并与委托方，确认验证方案的可行性和有效性;

签署委托书与支付：签署委托书，明确测试细节，确定测试费用并支付;

执行与监控实验测试：严格按照实验方案执行测试，记录数据，进行必要的控制和调整;

数据分析与出具报告：分析数据并进行归纳，撰写并审核测试报告，出具报告，并反馈结果给委托方。