需氧菌原料验收实验检测

检测项目

需氧菌总数测定：采用平板倾注法计数，检测限1×10¹ CFU/g，报告单位CFU/g或CFU/mL

大肠埃希氏菌筛查：使用VRBA培养基验证，检出灵敏度≤10 CFU/10g样品

沙门氏菌属检测：基于ISO 6579增菌培养，显色培养基鉴定，检测周期72±4小时

金黄色葡萄球菌定量：Baird-Parker平板计数，典型菌落直径0.5-1.5mm，检测限1 CFU/25g

铜绿假单胞菌鉴定：CN选择性培养基分离，42℃培养验证荧光色素

耐热芽孢杆菌计数：80℃水浴热处理10分钟后培养，检测耐热孢子总量

霉菌和酵母菌总数：沙氏葡萄糖琼脂培养，温度25±1℃，培养时间5-7天

梭状芽孢杆菌检测：强化梭菌培养基厌氧培养，检出限1 CFU/g

肠杆菌科计数：VRBG培养基验证，44.5℃培养24小时计数粉色菌落

单核细胞增生李斯特氏菌：显色培养基分离，典型蓝绿色菌落直径1-2mm

亚硫酸盐还原厌氧菌：硫乙醇酸盐流体培养基培养，检测温度30-35℃

革兰氏阴性菌鉴定：氧化酶试验结合API 20E系统，鉴定时间18-24小时

检测范围

药用辅料：淀粉、乳糖等固体制剂辅料，需检测微生物负载及内毒素

植物提取物：中药材粉末及浸膏，重点监控霉菌及芽孢污染

动物源性原料：明胶、胶原蛋白等，强制检测沙门氏菌及大肠杆菌

化妆品基质：甘油、角鲨烷等油性基质，采用膜过滤法除菌处理

食品添加剂：果胶、黄原胶等增稠剂，按GB 4789.2进行需氧菌计数

生物制品原料：血清白蛋白、细胞培养基，无菌检测需14天培养周期

包装材料：直接接触药品的PE膜、铝箔，取样面积100cm²/批次

水系统验证：纯化水、注射用水，每周监控需氧菌及电导率

发酵用原料：豆粕、玉米浆，检测耐热芽孢及噬菌体污染

医疗器械涂层：胶原涂层、海藻酸盐敷料，取样量10g/批次

保健食品原料：益生菌载体、蛋白粉，需控制肠杆菌科≤10 CFU/g

化工助剂：制药级滑石粉、硬脂酸镁，按USP<61>标准检测

检测标准

ISO 4833-1:2013 食品和动物饲料的微生物学-水平法计数

GB 4789.2-2022 食品安全国家标准 食品微生物学检验 菌落总数测定

USP<61> Microbiological Examination of Nonsterile Products

EP 2.6.12 Microbiological Examination of Herbal Medicinal Products

ISO 11133:2014 培养基制备、生产、储存和性能测试

GB/T 19973.1-2015 医疗器械的灭菌 微生物学方法

FDA BAM Chapter 3 Aerobic Plate Count

ISO 21528-2:2017 食品链微生物学 肠杆菌科检测计数

GB/T 13093-2020 饲料中细菌总数的测定

ISO 18593:2018 食品和动物饲料微生物学 表面取样技术

检测仪器

全自动菌落计数器：采用500万像素CCD成像，最小识别直径0.1mm，支持螺旋平板统计

微生物限度检验仪：0.22μm孔径滤膜，负压范围-80kPa～-20kPa，适用粘度≤8.0×10⁻³ Pa·s样品

恒温培养箱：温度范围10-70℃，精度±0.5℃，强制对流风速0.5m/s

实时荧光PCR仪：支持96孔板检测，熔解曲线分析精度±0.1℃，检出限10 copies/μL

全自动微生物鉴定系统：数据库含2500种菌株，质谱检测范围200-2000 m/z

厌氧培养工作站：氧浓度≤0.1%，湿度控制范围40-99% RH

膜过滤装置：47mm直径滤膜，最大处理量500mL/批次

生物安全柜：A2型，下降风速0.35±0.015m/s，进风流速0.55m/s

高压灭菌锅：灭菌温度121-134℃，压力0.22-0.24MPa，F0值≥15

激光菌落分析仪：分辨率10μm，计数速度4000CFU/min，符合21 CFR Part 11

检测服务流程

确认测试对象及项目：根据要求确认测试对象并进行初步检查，安排样品寄送或上门采样;

制定与确认实验方案：制定实验方案并与委托方，确认验证方案的可行性和有效性;

签署委托书与支付：签署委托书，明确测试细节，确定测试费用并支付;

执行与监控实验测试：严格按照实验方案执行测试，记录数据，进行必要的控制和调整;

数据分析与出具报告：分析数据并进行归纳，撰写并审核测试报告，出具报告，并反馈结果给委托方。